Деградация по Эдману || Механизм и этапы || Секвенирование белков || #наукадлястаршеклассников

Деградация Эдмана || Механизм и этапы || Секвенирование белков || #наукадлястаршеклассников Методы секвенирования белков || Деградация Эдмана || #наукадлястаршеклассников Пошаговая деградация Эдмана || Объяснение секвенирования белков || #наукадлястаршеклассников В этой лекции мы рассмотрим метод деградации Эдмана, краеугольный камень биотехнологии и биохимии, используемый для точного секвенирования белков. Мы обсудим, почему этот метод является предпочтительным для определения аминокислотной последовательности полипептидной цепи и чем он отличается от других методов, таких как метод Сэнгера. Основные темы: Почему секвенирование белков важно: Узнайте, как секвенирование помогает нам понять сворачивание, расположение и функцию белков, а также его роль в изучении таких заболеваний, как серповидноклеточная анемия. Метод «пошагового гидролиза»: В отличие от методов, которые гидролизуют всю цепь сразу, деградация Эдмана удаляет по одной аминокислоте за раз, сохраняя остальную часть пептидной цепи неповрежденной. Роль PITC (реагента Эдмана): Понимание того, почему фенилизотиоцианат (PITC) специфически атакует N-конец и как он создает уникальное производное (PTC) без первоначального разрыва пептидных связей. Пошаговый механизм: Соединение: Реакция с PITC в слабощелочных условиях (pH 8–9). Расщепление: Использование трифторуксусной кислоты (TFA) для селективного разрыва первой пептидной связи. Превращение: Превращение нестабильного производного ATZ в стабильную PTH-аминокислоту для идентификации. Методы идентификации: Как идентифицируются полученные PTH-аминокислоты с помощью ВЭЖХ, хроматографии или электрофореза. Это видео настоятельно рекомендуется студентам, готовящимся к экзаменам CSIR NET, GATE и университетским экзаменам по биохимии. Временные метки: 00:00 - Введение в деградацию Эдмана 01:46 - Важность секвенирования белков (пример серповидноклеточной анемии) 04:02 - Обзор методов секвенирования (Сэнгер, Эдман и масс-спектрометрия) 05:18 - Метод Эдмана: последовательный подход 07:41 - Реагент Эдмана (PITC) и почему он нацелен на N-конец 16:20 - Шаг 1: Соединение и образование PTC (щелочной pH) 19:44 - Шаг 2: Расщепление с помощью TFA 22:50 - Шаг 3: Превращение в стабильную ПТГ-аминокислоту 25:00 - Методы идентификации (ВЭЖХ и хроматография) Подписывайтесь на Senior's Science, чтобы узнать больше о биомолекулах: [@seniorsscience] ] #наукидлястарших #биохимия #секвенированиебелков #деградацияЭдмана #csirnet #наукиожизни #биотехнология #биомолекулы #лекциипохимии #биология #KUK #ignou #cdlusirsa #mdu #gju_hisar #csirnet #net #видео #лекция #видеолекция