Подвесные вставки Millicell® — Инструкция по применению — Глава 1: 2,5D-культивирование клеток

Вставки для клеточных культур Millicell® разработаны для повышения биологической значимости моделей in vitro. Традиционные пластиковые планшеты ограничивают клетки плоской, двумерной поверхностью, что ограничивает естественную клеточную полярность. Проницаемая мембрана вставки Millicell® позволяет клеткам получать доступ к среде и питательным веществам как с апикальной, так и с базальной стороны, способствуя улучшенному росту и созданию более качественных физиологических моделей. Вставки Millicell® можно использовать в таких областях, как анализы барьерной функции, скрининг ADME-токсикологии, анализы клеточной миграции и инвазии, а также в системах совместного культивирования. Наши подвесные вставки Millicell® доступны в 3 форматах лунок, 5 размерах пор и бывают оптически прозрачными или полупрозрачными. Теперь давайте подробнее узнаем, как использовать подвесные вставки Millicell®. Открыв новую подвесную вставку, отделите бумажный блистер от пластикового держателя и с помощью пинцета поместите вставку в планшет для клеточных культур. Здесь мы демонстрируем работу с 24-луночным подвесным вкладышем, одним из наиболее распространенных форматов. Обратите внимание на маркировку на одном из фланцев или выступов, которая поможет отслеживать ориентацию вкладыша. Убедитесь, что фланцы плоские и не перекрывают друг друга. Фланцы вкладыша обеспечивают легкий доступ к базальной стороне, не нарушая целостность вкладыша. Вкладыши обработаны для культивирования тканей, чтобы поддерживать адгезию клеток, но могут быть покрыты различными матрицами для улучшения адгезии клеток. Рекомендуемые объемы среды и плотность посева указаны в руководстве пользователя по адресу http://ms.spr.ly/6052saNLk. Рекомендуется, чтобы уровень среды на апикальной и базальной сторонах был равномерным. Убедитесь, что все фланцы плоские, чтобы крышка закрывалась плотно. Теперь поместите планшет в инкубатор для культивирования тканей. Если мембранные вкладыши прозрачны, вы можете наблюдать за ростом клеток с помощью микроскопии. В этом видео представлены примеры изображений данных, полученных с помощью прибора Millicell® DCI. Если вставки полупрозрачные, используйте Millicell® ERS 3.0 для неинвазивного измерения монослоя. В зависимости от вашего анализа, вам может потребоваться замена среды во время роста клеток. Апикальный вспомогательный ободок облегчает замену среды без контакта и риска повреждения клеточного монослоя. При замене среды подносите кончик пипетки под углом к апикальному вспомогательному ободу. Пожалуйста, обратитесь к нашему видео в Главе 2 для получения информации об обработке вставок для флуоресцентной визуализации и окрашивания гематоксилином и эозином. Для получения дополнительной информации, пожалуйста, свяжитесь с вашим менеджером по работе с клиентами или посетите http://ms.spr.ly/6053saNLZ