Хемилюминесцентный вестерн-блоттинг — надежный метод хемилюминесцентного обнаружения белков в вес...

Узнайте, как обнаруживать целевые белки на вестерн-блотах с помощью хемилюминесцентных реагентов, таких как хемилюминесцентные субстраты SuperSignal™ HRP ECL: https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/western-blotting/detect-proteins-western-blot/western-blot-detection-reagents/chemiluminescent-western-blot-detection.html?cid=bid_pca_wwg_r01_co_cp0000_pjt0000_vid888cwb_0so_yut_vo_edu_og_s24_chemiwb Смотрите Подробнее: https://www.youtube.com/playlist?list=PLEPpAkANrKHnjHTg3rizRSQzz8YMrswFM Что вы узнаете: • Как работает хемилюминесцентное детектирование в вестерн-блоттинге • Когда использовать ECL-субстраты на основе HRP • Как правильно применять реагенты для детекции • Советы по максимизации чувствительности сигнала • Как уменьшить фоновый сигнал для получения более четких полос Используемые материалы: • Хемилюминесцентный ECL-субстрат SuperSignal™ с HRP • Мембрана для вестерн-блоттинга (PVDF или нитроцеллюлоза) • Вторичные антитела, конъюгированные с HRP • Буфер для промывки (например, TBST) • Система визуализации или пленка • Инкубационные лотки или контейнеры Рассматриваемые шаги: 1. Промойте мембрану после инкубации со вторичными антителами. 2. Подготовьте хемилюминесцентный субстрат в соответствии с инструкцией. 3. Равномерно нанесите субстрат на мембрану. 4. Кратковременно инкубируйте для проявления сигнала. 5. Обнаружьте белковый сигнал с помощью системы визуализации или пленки. РАЗДЕЛЫ: 00:00 – Обзор хемилюминесцентного обнаружения 00:30 – Подготовка блота для обнаружения 01:05 – Нанесение субстрата ECL 01:45 – Проявление сигнала 02:20 – Визуализация белков Часто задаваемые вопросы В: Как выбрать правильную чувствительность субстрата ECL? Выбирайте в зависимости от количества целевого белка — субстраты с более высокой чувствительностью лучше всего подходят для белков с низкой экспрессией. В: Можно ли повторно использовать хемилюминесцентные субстраты? Нет. Субстраты следует готовить непосредственно перед использованием для оптимальной работы сигнала. В: Совместимо ли это с цифровыми системами визуализации? Да, субстраты SuperSignal™ совместимы с ПЗС и КМОП системами визуализации. #ВестернБлот #Хемилюминесценция #ОбнаружениеБелков #ЭХЛ #СуперСигнал #БиологияБелков #ТермоФишер #ЛабораторныеТехники